Untuk meminimalkan kontaminasi saat menyiapkan dan memasang fase mobile pada sistem LC/MS, penting untuk meminimalkan kontak dengan apa pun yang akan menyentuh solvent karena ini adalah titik potensi terjadinya kontaminasi. Anda perlu menyadari bahwa apa pun yang Anda sentuh perlu dibersihkan sebelum digunakan, baik dengan membilas komponen eksternal, atau dengan flushing sistem untuk komponen internal.
PROSEDUR
- Gunakan hanya botol solvent kaca borosilikat bening yang bersih.
- Jangan memasukkan alat gelas ke dalam dishwasher.
- Bilas botol tiga kali dengan solvent terakhir dan buang limbahnya sebelum diisi.
- Waters tidak merekomendasikan penggunaan botol solvent coklat/kuning yang banyak digunakan dalam menyimpan pelarut, karena kaca tidak dirancang untuk hal tersebut.
- Waters tidak merekomendasikan penggunaan solvent yang sudah dicampur dengan aditif sebelumnya dalam botol coklat/kuning, karena kaca tidak dirancang untuk menangani aditif.
- Jangan pernah mengisi atau menambah zat ke dalam botol solvent yang sudah terisi sebelumnya, karena ini memungkinkan kontaminan menumpuk seiring waktu.
- Gunakan solvent dan aditif LC/MS-grade.
- LC/MS-grade solvent memiliki standar kemurnian yang lebih tinggi daripada HPLC-grade solvent dan umumnya memiliki ion yang lebih sedikit/lebih rendah.
- Jika menggunakan sistem air sesuai permintaan (MilliQ) dengan resistansi 18,2MegaOhm, pastikan bahwa sistem air dirawat secara teratur sesuai rekomendasi vendor.
- Waters merekomendasikan untuk menggunakan seluruh botol 1 L daripada menuangkan dari botol 4 L, karena solvent yang tersisa dalam wadah besar lebih rentan terhadap kontaminasi saat disimpan.
- Gunakan hanya aditif LC/MS-grade seperti asam format dan amonia.
- Gunakan ampul sekali pakai untuk aditif daripada terus-menerus mencelupkan ke dalam wadah bersama yang lebih besar.
- Gunakan sarung tangan nitril bersih dan kering untuk menyiapkan dan memasang solvent.
- Jika sarung tangan menjadi basah di titik manapun, maka Anda harus menggantinya karena dapat menyebabkan kontaminasi. (Catatan: sebagian besar sarung tangan, bahkan sarung tangan “bebas bedak”, masih memiliki bedak atau bahan anti-lengket di bagian luar untuk mencegah lengket.)
- Daripada mencoba menjaga sarung tangan tetap kering, cucilah sebelum digunakan.
- Alirkan sarung tangan di bawah H2O LC/MS-grade dan gosok seolah-olah mencuci tangan.
- Kocok dan biarkan mengering dengan sendirinya. Jangan gunakan handuk.
- Gunakan langkah pengukuran minimal untuk menyiapkan fase mobile dan pencucian.
- Untuk solvent asam format 0,1%:
- Tuang solvent 1 L langsung ke dalam botol bersih tanpa menggunakan alat gelas perantara apa pun.
- Pipet 1 ml asam format pekat ke dalam botol solvent 1 L.
- Jangan tutup botolnya.
- Aduk solvent atau vortex untuk mencampur.
- Jika menggunakan tutup botol, jangan membalik botol untuk mencampur karena tutupnya mungkin tidak bersih.
- Untuk solvent lain dengan aditif:
- Tuangkan solvent langsung ke dalam botol bersih tanpa menggunakan alat gelas perantara apa pun.
- Gunakan pipet bersih dan ujung pipet untuk mengukur volume aditif yang sesuai dan tambahkan langsung ke botol solvent.
- Hindari kontak antara ujung pipet dengan botol atau solvent.
- Jangan tutup botolnya.
- Aduk solvent atau vortex untuk mencampur.
- Jika menggunakan tutup botol, jangan membalik botol untuk mencampur karena tutupnya mungkin tidak bersih.
- Untuk pencucian dan campuran solvent lain tanpa aditif (misalnya, 90:10 H2O:ACN):
- Pengukuran yang tepat umumnya tidak terlalu penting untuk pencucian ini.
- Jangan gunakan silinder ukur atau gelas kimia tambahan untuk pengukuran perantara.
- Gunakan kalibrasi botol solvent untuk menuangkan volume solvent yang sesuai.
- Jangan tutup botolnya.
- Kocok solvent atau vortex untuk mencampur.
- Jika menggunakan tutup botol, jangan membalik botol untuk mencampur karena tutupnya mungkin tidak bersih.
- Persiapan untuk memasukkan saluran/filter solvent ke dalam botol solvent:
- Jangan langsung memasukkan saluran solvent ke dalam botol solvent.
- Siapkan larutan pencuci H2O:ACN 50:50 dari solvent LC/MS-grade , atau tuangkan sedikit fase mobile yang baru dibuat ke dalam wadah kaca bersih.
- Pegang saluran solvent dari atas tutup, celupkan filter dan tabung solvent ke dalam larutan pencuci dan putar selama 10 detik.
- Tanpa menyentuh area basah pada saluran/filter solvent, angkat dari larutan pencuci, kocok, dan biarkan menetes kering selama 10 detik. Jangan keringkan dengan handuk atau Kimwipe.
- Masukkan saluran solvent dan filter ke dalam botol fase mobile akhir.
- Amankan penutup di atas botol solvent.
- Tutup/penutup solvent atau aluminium foil masih acceptable asalkan tidak bersentuhan dengan solvent.
- Jangan gunakan parafilm untuk menutup solvent karena sangat mungkin memasukkan kontaminan.
- Ulangi untuk setiap saluran solvent.
- Buang larutan pencuci yang digunakan untuk membilas filter solvent.
- Untuk solvent asam format 0,1%:
- Prime semua saluran fase mobile/pencuci.
- Flush LC ke limbah dengan komposisi fase mobile organik tinggi (15% aqueous:85% organik).
- Jalankan beberapa injeksi kosong sebelum pengambilan sampel.
Sumber: How to prepare and install mobile phases on an LC/MS system to minimize contamination – WKB96258